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NEST細胞培養(yǎng)如何選擇合適的呢?

點擊次數(shù):2012 更新時間:2021-06-22
  NEST細胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。也叫細胞克隆技術(shù),在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術(shù)。
 
  不論對于整個生物工程技術(shù),還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說,本身就是細胞的大規(guī)??寺 <毎囵B(yǎng)技術(shù)可以由一個細胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。
 
  市場上的NEST細胞培養(yǎng)可不少,如何選擇合適的呢?我們需要重點考慮孔的數(shù)量、孔的形狀、微孔板顏色以及表面處理。
 
  1.孔的數(shù)量
 
  大多數(shù)用戶在組織培養(yǎng)瓶上開始組織培養(yǎng)。不過,許多應用也需要多孔板。理想的數(shù)量嘛,取決于你所需的通量水平,以及是否有機器人的協(xié)助。*手動地向96孔板中添加試劑,這并非不可行,但有電動移液器或機器人的幫助當然更好。擴展到384孔板,就更加需要機器人,而1536孔板更是絕對需要。當然,高密度多孔板的挑戰(zhàn)還在于分析小型化。
 
  2.孔的形狀
 
  孔的底部可以選擇平的、圓的,或錐形的,這取決于細胞類型和下游應用。特別是需要對培養(yǎng)物進行成像或分光光度測定,通常平底(F-bottom)。對于不存在接觸抑制的細胞,弧形底(C-bottom)也不錯。圓底(U-bottom)適合懸浮培養(yǎng),因為圓的表面讓細胞難以附著和生長。而錐形底很少用于細胞培養(yǎng)實驗,但在細胞沉淀時可能有用。
 
  3.微孔板的顏色
 
  多孔板的顏色也與應用息息相關。如果用相差顯微鏡或肉眼觀察細胞,可選擇透明的多孔板。不過,對于可見光光譜以外的應用(如冷光或熒光),有顏色的多孔板(如白色或黑色)則是必需的。在使用從頂部讀數(shù)的儀器時,底部應該是不透明的,而使用顯微鏡或底部讀數(shù)的儀器時,應選擇底部透明的多孔板。冷光樣品通常選擇白色表面,以便最大限度提高信號的反射率,而大于300 nm的熒光應用通常使用黑色表面,以吸收激發(fā)信號。有顏色的表面還可以防止相鄰孔之間的信號串擾。
 
  4.表面處理
 
  選擇哪種細胞表面處理,這要取決于你培養(yǎng)的是懸浮細胞還是貼壁細胞。對于懸浮或球體細胞培養(yǎng),它經(jīng)過專門的疏水凝膠處理,可抑制細胞或蛋白附著。對于輕松附著的貼壁細胞(如HeLa),標準的組織培養(yǎng)表面就足夠了。對于那些貼壁有困難的細胞(如原代細胞),或涉及到嚴格洗滌的應用,建議使用BRAND的cellGrade微孔板。這種*的表面與多聚賴氨酸處理的表面相似,但它不是涂層,而是塑料性質(zhì)的物理變化,因此不需要冷藏。對于那些敏感細胞或血清量減少的細胞,建議使用cellGrade plus表面。
 
  當然不能忽視培養(yǎng)容器的質(zhì)量。這不僅僅指NEST細胞培養(yǎng),還包括與細胞接觸的一切,比如吸頭,以避免細胞污染或死亡。
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